卤虫养殖条件初探
卤虫（ Artemia ），甲壳动物亚门，鳃足纲，无甲目，卤虫科，作为优良的基础实验材料，广泛应用于分子生物学/毒理学、水生生物学、放射生物学等生物学科中（侯林等）。卤虫是一类原始的甲壳类动物，并能栖息在高盐度环境下（Persoone等）。在水产养殖中，可以使用卤虫的两种衍生产品：一是休眠卵可以长时间保存且可以在需要孵化时24小时完成孵化，以无节幼体的形式提供活体饵料；二是成年个体可以作为活体、冷冻、干燥产品提供给鱼虾养殖以及小鸡和幼鸟饲喂（Zmora等）。
目前大部分生产经营者和管理者文化水平较低，对卤虫生活习性没有一个直观的认识，仍使用传统简单粗暴的方式进行生产捕捞，缺乏科学的生产管理经验。实践证明，想要提高卤虫卵品质和产量，需要转变旧观念，引进先进的生产技术及科学观念，投喂微藻、麸皮、豆腐渣、光合细菌等成本低、见效快的农副产品，同时有效利用生产废物，在现有的虾—卤虫—盐生产模式中实现资源利用最大化。卤虫通过滤食单胞藻降低水体中的氮磷水平，其残体又为结晶区红色嗜盐细菌生长提供必要的食物，盐田中的卤虫和嗜盐细菌可降低卤水粘度、增加水色、提高蒸发量，从而有效提高盐的产量和质量（Tackaert等）。
现阶段卤虫养殖多停留在单一自繁模式，卤虫摄取自然环境下盐池或盐湖中的藻类等其他物质作为饵料，没有被进行人工科学大规模投喂。如何科学有效、高质量地喂养卤虫成为一个亟需解决的问题。只有保证充足的饵料供给才能提高单位水体中卤虫的密度，才能提高卤虫卵的单位面积产量。
一、实验材料与方法
（一）实验材料及条件
本实验材料为友发集团提供的山东渤海湾盐田卤虫卵、俄罗斯盐湖卤虫卵、乌兹别克斯坦盐湖卤虫卵以及西藏盐湖卤虫卵。实验所需的盐水由原盐（取自无棣第二盐场）与人工海水晶（中盐人工海水）1:1混合配制（LS28T食品盐度计测定盐度），配制成所需的不同盐度梯度后充气搅拌一段时间并静置，取上清用网绢过滤去除砂石等杂质。
（二）研究方法
实 验 数 据 采 用 E x c e l 2 0 0 7 及SPSS17.0生物统计学方法分析整理。对 所 得 数 据 进 行 单 因 素 方 差 分 析（One-way ANOVA）， P <0.05作为差异显著水平。
（三）卤虫卵孵化条件的设定
选取收购并经过初加工的来自不同环境的卤虫卵进行实验孵化，孵化前在冰箱中保存（3℃～4℃），孵化盐度设定为20，盐水由原盐（取自无棣第二盐场）与人工海水晶（中盐人工海水）混合制备，并用盐度计检测确认盐度。温度根据生活习性，渤海盐田卤虫、俄罗斯盐湖及乌兹别克斯坦盐湖设定为30℃（高温），西藏盐湖则为28℃（低温）。取每种虫卵取250mg，用纸送入250mL锥形玻璃管底部，加入配制好的盐水（盐度20）至250mL刻度，放入恒温水箱，插入通气管从底部充气，用胶头滴管吸取盐水将附着在管壁的虫卵冲入水中。记录时间。在实验室模拟卤虫生存环境条件设计孵化装置，孵化通气24小时后使用移液枪，每支试管取四次，共分四组，每次吸取100μL，注入24分盘，每个小盘中滴入碘酒，杀死活的无节幼体便于计数，在解剖镜下计数无节幼体个数后，滴入3%次氯酸钠溶液，去除已孵化及未孵化卵卵壳，留下黄色胚胎并计数。统计出总数∑，然后计算孵化率。
∑=无节幼体数+伞状数+胚胎数，孵化率=无节幼体数/∑。
表1 渤海湾盐田卤虫卵孵化数
注：∑=218，孵化率=0.885
表2 俄罗斯盐湖卤虫卵孵化数
注：∑=110，孵化率=0.745
表3 乌兹别克斯坦（咸海）卤虫卵孵化数
注：∑ =142，孵化率=0.838
表4 哈萨克斯坦盐湖卤虫卵孵化数
注：∑=217，孵化率=0.8294
表5 不同种类卤虫卵孵化率的比较
（四）卤虫体长和生长速率测定
实验准备喂养饵料共五种，分别为麸皮、豆腐渣、沼液、光合细菌、微拟球藻。①取麸皮，使用粉碎机粉碎后，加水中混入适量酵母菌搅拌均匀密封发酵三天后使用；②取干豆腐渣加水搅拌均匀封上铝箔发酵三天后使用；③收集养殖场的养殖废水pH=7，接种淡水光合细菌至沼液颜色变深红色；④购买海水光合细菌，盐度为20；⑤培养微拟球藻，24h光照通气培养，提升盐度梯度至其培养海水盐度80。准备五个1L烧杯，加入配好的盐水（粗盐与人造海盐混合），盐度为80，每个烧杯吸取加入前一日孵化24h的新鲜无节幼体200个～300个，通气，每个烧杯加入对应足量的饵料至Secchi disk（Zmora）状态。每日更换50%的盐水并用胶头滴管吸取杯底的排泄物，每天同一时间，使用170μm筛网过滤，选取一部分无节幼体在解剖镜下测量体长，测量后将其放回对应的烧杯中。水温控制在26℃～28℃。
（五）卤虫卵生物学测定参数
孵化效率：指每克卵能够孵化产生无节幼体的数量。
孵化量：指每克卵，能孵化出的无节幼体的总重量，同时孵化量是由孵化效率乘以无节幼体的平均体重获得，在水产养殖中具体实践中，应选择孵化量和孵化效率都高的卤虫卵种类。从营养学角度上，应选择产生较重无节幼体和较高孵化量的的卤虫卵。
二、实验结果与分析
（一）实验结果
测定孵化率：同时放入，24h后进行测定，保持通气量温度光照强度等条件恒定。各品种卤虫卵孵化情况见表1～表4。
如表5示，渤海湾孤雌生殖卤虫卵孵化率显著高于俄罗斯盐田、乌兹别克斯坦、哈萨克斯坦地区卤虫（ P <0.05），除去湾渤海湾，其他三个地区卤虫卵孵化率之间无显著差异（ P >0.05）。
西藏盐湖卤虫需在低温条件下较长时间才能孵化，需要辅助破壳剂才能获得相对较高的孵化率和使用较短的时间，在本实验设定的温度条件下孵化效率低，故不予参考。根据实验及统计图表可知，在实验室其他条件设定相同时，渤海湾卤虫拥有最优的孵化率，远高于国外其他盐湖盐田产品。
（二）饵料对卤虫体长的影响
不同饵料对卤虫体长的影响见图1～图4、表6。
豆腐渣组由于来自已经浸泡而后研磨的加工豆制品残渣，颗粒较小，便于发酵后由卤虫进食。改组初期生长速率正常，后期生长速率逐步升高，最后远高于其他组，13天左右开始成熟，较其他组最优。沼液组投喂两日后发现无节幼体大量死亡，经分析可能是沼液成分颗粒较大，导致无节幼体无法进食，有效饵料成分较少并且不易消化，导致无节幼体因缺乏营养而死亡。海水光合细菌组，无节幼体正常生长，较豆腐渣组生长速率较慢。麸皮组，可能由于研磨浸泡不充分，不能充分的将有效物质浸泡出来或有效物质体积较大，无节幼体无法有效进食，因饵料不足大量死亡，同时也极易造成水质恶化导致无节幼体死亡。微拟球藻组初期生长速率最快，但是中期速度减缓，成熟时间较长，可能微拟球藻在卤虫消化道中缺少对应的消化酶等物质，卤虫无法分解其中营养物质。
图1 摄食豆腐渣对卤虫日均体长的影响
图2 摄食光合细菌对卤虫日均体长影响
图3 摄食微拟球藻对卤虫日均体长影响
图4 不同饵料卤虫体长测定
三、讨论
（一）不同卤虫品系比较
相较于俄罗斯盐湖、乌兹别克斯坦（咸海）、哈萨克斯坦盐湖卤虫品系，渤海湾盐田孤雌生殖卤虫有良好的孵化率，优质卤虫卵孵化率能达到90%以上，远远高于其他品种。同时，其他品种的卤虫卵多来自于盐湖，多位于高纬度地区，气候寒冷，卤虫卵孵化抗热性较差，适用范围小，难以进入热带地区，相对而言渤海湾盐田孤雌生殖卤虫具有良好的适应性。同时孤雌生殖卤虫大部分为雌性，只有少量的雄性个体，相对节约了饵料，增加了产卵量，提高了生产效率。不同种群卤虫中雌体寿命以孤雌生殖卤虫为最长，每次怀卵量也是以孤雌生殖卤虫为最多。
（二）饵料对卤虫生长速率影响
通过实验发现，在饵料充足的情况下，投喂微拟球藻使无节幼体生长前几日具有最高的生长速率，但随着时间推移，可能由于缺少分解消化所需要的酶，生长逐渐停滞，性成熟时间大大推迟。在实验室实验中，可能由于麸皮发酵不完全等因素，导致饵料颗粒过大，无节幼体无法进食大量死亡。在开放水域中，麸皮得到有效的发酵，提供了充足饵料，使卤虫密度获得最大。豆腐渣由于是食品加工的副产品，已经经过完整的浸泡研磨，容易被摄取食用，投喂过程中卤虫表现出优秀的生长速率和存活率，但开放水域中效果稍逊于麸皮组。接种光合细菌的沼液，可能由于沼液中含有某些物质，导致光合细菌繁殖较慢，不能有效分解沼液中的营养物质使其容易被卤虫摄取消化，大量固体颗粒残留在卤虫肠道中导致卤虫死亡。化肥和鸡粪的作用是丰富水体营养环境，使藻类大量繁殖从而为卤虫提供大量优质饵料，在开放水域实验初期，卤虫密度大量增加，但当卤虫密度持续升高时，大量藻类被摄取，饵料大量减少不足以维持卤虫生长发育，导致卤虫种群密度大幅下降。
（三）环境因素对卤虫室外生产的影响
卤虫运动轨迹受风向的影响，随风而动。在投喂饵料时，可根据风向和水流方向，顺流投放，提高饵料作用效率，提高生长速率。六七月为旱季，降水量骤减，可适当引水，补充盐池因高蒸发量失去的水分，从而降低盐池盐度，使卤虫有一个良好的盐度生存环境。七月中旬至八月初为雨季，大量雨水使盐池盐度降低，缓解池水高温，使卤虫能够大量生长繁殖，存活率提高（Tirantaphyllidis等）。渤海湾塘沽盐场孤雌生殖卤虫存活率在盐度60和100时较高，而在盐度35、140和180的存活率较低。同时雨水伴随风裹挟大量岸边泥土中的卤虫卵及藻类进入盐池，为盐池提供丰富饵料及新生幼体。卤虫卵重量较轻，随风漂浮在水面上，一般选在午后和傍晚在下风口进行捕捞。因为光照影响卤虫运动摄食效率，持续光照条件以及长的光周期条件下，卤虫从食物中获取的能量被大量的用于各种运动所消耗，造成饵料转化效率低下，可在天气晴朗的环境下适量增加投喂量，在阴天或雨天的情况下维持或减少投喂量，防止饵料浪费和污染水质。
因此，在不同季节不同环境变化情况下，要根据实际生产需要进行人工辅助卤虫生产。在六七月份旱季，蒸发量大气温高，可适当引水降低池水温度及盐度，同时人工投喂饵料，弥补降雨不足导致的卤虫饵料短缺，使卤虫种群数量保持在一定范围内。根据卤虫种群密度调节池水饵料投放量，既要防止过多的饵料未被利用而污染水质并造成浪费，提高饵料利用效率，又要防止饵料投放量过少，导致卤虫在受精产卵阶段缺少足够的饵料产量减小。